一文帶你快速了解恒溫?zé)晒鈹U(kuò)增儀的原理
更新時(shí)間:2022-05-25 點(diǎn)擊量:1417
恒溫?zé)晒鈹U(kuò)增儀主要是用來(lái)定量分析和確定基因轉(zhuǎn)錄水平的,而普通基因擴(kuò)增儀是做定性分析和擴(kuò)增基因片段製造業,熒光定量基因擴(kuò)增儀可以做普通基因擴(kuò)增儀的工作指導,而反之就不行了相關性,況且這樣代價(jià)太大了範圍和領域,一般的實(shí)驗(yàn)室都不允許這樣做的能力和水平〔缓侠聿▌??傊畠烧叩墓δ懿荒芑ハ嗳〈?div> 普通基因擴(kuò)增儀只能夠定性地分析是否存在目標(biāo)片段應用前景。但是價(jià)格要低很多有很大提升空間,而且運(yùn)行成本也要低很多。不過(guò)不能直接得到擴(kuò)增結(jié)果首次,還需要做電泳檢測(cè)可能性更大。實(shí)際中檢測(cè)遺傳疾病,品種分子標(biāo)記篩選搖籃,甚至親自鑒定等都可以由普通基因擴(kuò)增儀完成技術。
但是,某些需要定量的實(shí)驗(yàn)就必須用到實(shí)時(shí)定量基因擴(kuò)增儀了推動。比如檢測(cè)某些病原物的數(shù)量(血液乙肝病毒復(fù)制程度)相對較高,特定基因的表達(dá)量(比如結(jié)合反轉(zhuǎn)錄做的RNA定量分析),某些基因在染色體組中拷貝數(shù)等等信息。熒光定量基因擴(kuò)增儀一般不需要對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析相關,操作相對(duì)簡(jiǎn)單些,但是耗材實(shí)在是貴豐富內涵。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)生產效率,普通基因擴(kuò)增儀只能擴(kuò)增,不能檢測(cè)適應性,便宜節點。熒光定量基因擴(kuò)增儀除了擴(kuò)增,還能在擴(kuò)增的同時(shí)檢測(cè)DNA發(fā)出的熒光信號(hào)落地生根,試劑和儀器都更貴的特點。
恒溫?zé)晒鈹U(kuò)增儀原理:
標(biāo)記有熒光素的TaqMan探針與模板DNA混合后,完成高溫變性建設項目,低溫復(fù)性最為突出,適溫延伸的熱循環(huán)模式,并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律自動化,與模板DNA互補(bǔ)配對(duì)的TaqMan探針被切斷,熒光素游離于反應(yīng)體系中高品質,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光不折不扣,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長(zhǎng)資源優勢,通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)與之對(duì)應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號(hào)強(qiáng)度高效利用,求得CT值,同時(shí)利用數(shù)個(gè)已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照估算,即可得出待測(cè)標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)講理論。